大发3dLogo

热门词:生物显微镜 水质分析仪 微波消解 荧光定量PCR 电化学工作站 生物安全柜

山东博科
现在位置首页>实验试剂制品>核酸纯化>DNA提取纯化>EX1110-50T 质粒小量提取试剂盒 金克隆
EX1110-50T 质粒小量提取试剂盒 金克隆
EX1110-50T 质粒小量提取试剂盒 金克隆
  • EX1110-50T 质粒小量提取试剂盒 金克隆

EX1110-50T 质粒小量提取试剂盒 金克隆

产品报价:120元

更新时间:2020/3/24 8:53:47

地:北京

牌:金克隆

号:EX1110

厂商性质:

公司名称: 金克隆(北京)生物大发3d有限公司

产品关键词: 质粒小量提取   金克隆   质粒小提  

123
访问人数
0
累计评论


黄晶丽 : (13341101640) (01059770309)

(联系我时,请说明是在大发3d上看到的,谢谢!)


质粒小量提取试剂盒说明书

货号:EX1110

规格:50T/100T

保存:常温保存,复检期一年。RNase A -20℃保存。

试剂盒内容:

试剂盒组成

50T

100T

Storage

RNase A

300uL

500uL

-20

溶液

15mL

30mL

RT

溶液

15mL

30mL

RT

溶液

20mL

40mL

RT

漂洗液

15mL

15mL×2

RT

洗脱液

15mL

30mL

RT

吸附柱

50

100

RT

收集管

50

100

RT

说明书

1

1

--

产品说明:EX1110-50T 质粒小量提取试剂盒 金克隆

       本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA 离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。 使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。溶液在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的 RNaseA 全部加入),混匀,置于 2-8保存。如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

操作步骤:EX1110-50T 质粒小量提取试剂盒 金克隆

1、取1-5mL细菌培养物,12000rpm离心1min,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。

2、向留有菌体沉淀的离心管中加入250uL溶液(请先检查是否已加入RNaseA),使用移液器或旋涡振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意:如果菌块未彻底混匀,会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。

3、向离心管中加入250uL溶液,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意:混匀一定要温和,以免污染细菌基因组DNA,此时菌液应变得清亮粘稠,作用时间不要超过5 min,以免质粒受到破坏。

4、向离心管中加入350uL溶液,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。12000rpm离心10 min,用移液器小心地将上清转移到另一个干净的离心管中,尽量不要吸出沉淀。注意:溶液加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上清。

5、将上一步所得上清液加入吸附柱中(吸附柱加入收集管中),室温放置2min12000rpm离心1min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

6、向吸附柱中加入700uL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。

7、向吸附柱中加入500uL漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。

812000rpm离心2min,将吸附柱敞口置于室温或50温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。

9、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200uL65水浴预热的洗脱液,室温放置2min12000rpm离心1min

10、为了增加质粒的回收效率,可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中,室温放置2min12000rpm离心1min

注意事项:EX1110-50T 质粒小量提取试剂盒 金克隆

1、使用前请先检查溶液和溶液是否出现混浊,如有混浊现象,可在37水浴中加热几分钟,待溶液恢复澄清后再使用。溶液、溶液和漂洗液使用后应立即拧紧盖子。

2、洗脱缓冲液体积不应少于50uL,体积过小影响回收效率洗脱液的pH值对洗脱效率也有影晌,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围)pH值低于7. 0会降低洗脱效率,DNA产物应保存在-20,以防DNA降解。

3 如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应加大菌体使用量,使用5-10mL过夜培养物,同时按照比例增加溶液、溶液和溶液的用量,吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率。

4DNA浓度及纯度检测:得到的质粒DNA纯度与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。得到的DNA可用琼脂糖疑胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。 DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50ug/mL双链DNA40ug/mL单链DNAOD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响吸光值,但并不表示纯度低。

 

EX1110

质粒小量提取试剂盒

EX1113

无内毒素质粒小量提取试剂盒

EX1120

质粒大量提取试剂盒

EX1123

无内毒素质粒大量提取试剂盒

EX1210

革兰氏阳性菌质粒小量提取试剂盒

EX1220

革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒

EX1310

酵母质粒提取试剂盒

EX1100

革兰氏阳性菌基因组DNA提取试剂盒   

EX1150

细菌基因组DNA提取试剂盒

EX1300

酵母基因组DNA大量提取试剂盒   

EX1350

酵母基因组DNA提取试剂盒

EX1355

真菌基因组DNA提取试剂盒

EX1450

植物基因组DNA提取试剂盒

EX1550

动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒

EX1650

全血基因组DNA提取试剂盒

EX1652

全血基因组DNA提取试剂系统

EX1750

土壤基因组DNA提取试剂盒

EX1752

粪便基因组DNA提取试剂盒

EX1754

DNA病毒基因组提取试剂盒

EX1784

RNA病毒基因组提取试剂盒

EX1850

通用基因组DNA提取试剂盒

EX0108

DNA提取液(25:24,pH>7.8

EX0118

DNA提取液(125:24:1,pH>7.8

EX1800

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

EX1802

聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒

EX1804

DNA产物纯化试剂盒