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EX1800-50T 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒  胶回收 金克隆
EX1800-50T 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒  胶回收 金克隆
  • EX1800-50T 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒  胶回收 金克隆

EX1800-50T 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 胶回收 金克隆

产品报价:150元

更新时间:2020/3/24 9:28:02

地:北京

牌:金克隆

号:EX1800

厂商性质:

公司名称: 金克隆(北京)生物大发3d有限公司

产品关键词: DNA回收   金克隆   DNA纯化   胶回收  

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琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒说明书

货号:EX1800

规格:50T/100T

保存:常温干燥保存,复检期为一年。

试剂盒内容:EX1800-50T 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒  胶回收 金克隆

名称

EX1800-50T

EX1800-100T

溶胶液

50mL

100mL

漂洗液

15mL

15mL×2

洗脱液

15mL

30mL

吸附柱

50

100

收集管

50

100

说明书

1

1

  EX1800-50T 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒  胶回收 金克隆

产品说明:EX1800-50T 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒  胶回收 金克隆

       本试剂盒采用可以高效、专一结合的DNA硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAETBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100bp-10kb大小的片段,回收率大于80%(小于100bp和大于10kbDNA片段回收率为30-50%)。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。

注意事项:在使用本试剂盒前请阅读此注意事项。

1.      电泳前最好更换成新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。

2.      如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。

3.      切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。

4.      回收小于100bp和大于10kbDNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。

5.      回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。

6.      如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

操作步骤: (使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。)

1、  琼脂糖凝胶电泳后,将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入干净的离心管中,称取重量。

2、  向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100μL,则加入300μL溶胶液),50-55水浴放置10min,期间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。

注意:溶胶时,如果溶胶液变为红色(正常情况下为淡黄色),可向含有DNA的胶溶液中加入10-30μL 3M醋酸钠(pH5.2)将胶溶液调为淡黄色,否则将会影响DNA与吸附柱的结合,影响回收效率。

3、  将上一步所得溶液加入一个吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。

注意:胶块完全溶解后最好将胶溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在较高温度时结合DNA的能力较弱。

4、  向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。

5、  向吸附柱中加入600μL漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。

6、  12000rpm离心2min,尽量除去漂洗液。将吸附柱敞口置于室温或50温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,防止漂洗液中的乙醇影响后续的实验。

7、  将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加适量经65水浴预热的洗脱液,室温放置2min12000rpm离心1min

注意:

1)、为了增加回收效率,可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中,12000rpm再次离心1min

2)、洗脱缓冲液体积不应少于30μL,体积过小影响回收效率。

3)、洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。

8DNA产物-20保存。

 

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